1. Wprowadzenie do zajęć.
Organizacja ćwiczeń, wymagania, zasady bezpieczeństwa. Podstawowe techniki w diagnostyce mikroorganizmów- ćwiczenia i zasady
pipetowania.
2. Pozyskanie materiału do badań w diagnostyce mikroorganizmów.
Izolacja DNA bakterii Gram(-) na kolumnach ze złożem krzemionkowym. Elektroforeza na żelu agarozowym.
3. Identyfikacja szczepów z gatunku Malassezia pachydermatis za pomocą techniki PCR-RFLP.
Technika PCR-RFLP – podstawy teoretyczne.
PCR – łańcuchowa reakcja polimerazy (sekwencja podjednostki 26S-rRNA).
RFLP – trawienie produktów reakcji PCR enzymem restrykcyjnym HhaI
4. Diagnostyka mikroorganizmów w oparciu o system MLST, cz.I.
System MLST – podstawy teoretyczne.
PCR – łańcuchowa reakcja polimerazy.
5. Diagnostyka mikroorganizmów w oparciu o system MLST, cz.II.
Oczyszczanie DNA po reakcji PCR.
Reakcja sekwencjonowania.
6. Diagnostyka mikroorganizmów w oparciu o system MLST, cz.III
Usuwanie nieprzyłączonych dideoksynukleotydów (ddNTP) po reakcji
sekwencjonowania.
Rozdział zsekwencjonowanych fragmentów DNA na sekwenatorze kapilarnym ABI 3130.
7. Diagnostyka mikroorganizmów w oparciu o system MLST, cz.IV
Praca z internetową witryną MLST.
Identyfikacja szczepów badanej bakterii w bazie MLST.
8. Podsumowanie (referaty), cz.I
Diagnostyka mikroorganizmów – referaty studentów:
a) "Ogólne zasady postępowania w diagnostyce mikroorganizmów".
b) "Metody oparte na identyfikacji kwasów nukleinowych obecne w rutynowej diagnostyce mikrobiologicznej".
c) "Zakażenia szpitalne i dochodzenia epidemiologiczne".
d) "Diagnostyka chorób infekcyjnych przewodu pokarmowego".
e) "Diagnostyka niektórych chorób przenoszonych przez kleszcze i wektory owadzie".
f) "Badania bakteriologiczne krwi."
9. Podsumowanie (referaty), cz.II
Diagnostyka mikroorganizmów – referaty studentów:
a) "Diagnostyka chorób wywołanych bakteriami beztlenowymi."
b) "Diagnostyka gruźlicy i innych mikrobakterioz."
c) "Diagnostyka chorób infekcyjnych skóry i tkanki podskórnej."
d) "Diagnostyka chorób infekcyjnych układu oddechowego."
e) "Diagnostyka chorób przenoszonych drogą płciową."
f) "Diagnostyka chorób powstałych w wyniku zakażeń okołoporodowych."
10. Sprawdzenie wiedzy i nabytych umiejętności - kolokwium.
|